时间:2023-07-04 18:36 / 来源:未知
我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结如下_常见的毒品有哪些ELISA试验以灵活度较高、特异性较好的特性正在临床上取得了平常的利用,但操作中的各个症结对试验的检测结果影响较大,如不细心,有或者导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个症结常浮现题目的缘故及管理主张总结如下,以期给同行带来少少饱动,提升试验质地。
1 挑选试剂挑选质地优异的检测试剂,庄敬根据试剂仿单举办操作,操作前将试剂正在室温下平均30-60分钟。
2)手工操作中,加样板过众形成加样后放入孵箱前守候时辰过长(十分是室内温度较高时);
3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。管理主张:①标本为血清:最好将血液先自然存放1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:务必运用含抗凝剂的血液标本收罗管,采血后务必速即异常采血管搀和5-10次,安排一段时辰后,3000rpm离心15分钟;若正在几天内检测,可放正在2-8℃冰箱中,若要储存,则置于-20℃的低温冰箱内。②加样后实时放入孵箱。③加酶试剂后用吸水纸正在酶标板外外轻拭吸干。④借使采用AT或其他全自愿加样,最好挑选FAME或其他后管束仪器加酶试剂。⑤标本较众时,请分批操作。
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于洗濯彻底;
2) 孵育时辰人工延迟,导致非特异性贯串紧附于反响孔四周,难以洗濯彻底。管理主张:①贴封片或加盖;②按分析步伐庄敬掌握操作时辰。
2) 采用半自愿洗板机洗板时,洗液量亏空,导致洗板不彻底;洗板针阻碍,抽吸不统统;洗板不畅,导致洗板结果差;
3) 反响板过众形成洗板守候时辰长。管理主张:①包管洗液注满各孔,洗板针疏通,洗完板后最好正在吸水纸(挑选洁净、无或少尘的吸水资料)上轻轻拍干;②合理支配,或众用几台洗板机。
2) 加显色剂时溅出孔外形成液体回流。管理主张:①显色剂尽量正在临用前配制,相持无须逾期显色剂,肉眼可睹浅蓝色的TMB显色剂无须;②加样时连结显色剂不过流;③A、B液应避免接触金属用具。
6 终止或者缘故如加终止液时发生较众气泡,导致假阳性增进。因而正在加终止液时应避免产赌气泡。
因而正在全部操作历程中包管酶标板不接触次氯酸; 尽或者竣工ELISA检测程序自愿化,有用提升检测质地。
正在实践操作中,除了挑选优异试剂外,务必庄敬根据操作步伐举办操作,同时作好室内质控、室间质评,以厉谨的职业态度检测每一份标本,才气包管检测质地。现正在邦内已有相当数目的单元具有全自愿酶标仪,这对待竣工ELISA程序化检测、提升检测质地起到了紧急效用。